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在使用RNA提取試劑前有哪些注意事項呢
釋出時間•▩:2022-06-14   點選次數•▩:143次
  TRIzon是廣譜型總RNA提取試劑☁╃╃。實驗操作快速方便│₪,顏色鮮明│₪,便於分層☁╃╃。本試劑適用範圍廣泛│₪,可以從動物組織╃▩₪╃、植物材料╃▩₪╃、各種微生物及培養細胞等樣品中提取總RNA☁╃╃。
 
  樣品在TRlzon中被充分裂解的同時能夠最大限度地保證RNA的完整性☁╃╃。在加入氯仿離心後│₪,溶液會分成三層:上層無色水相╃▩₪╃、中間層和下層紅色有機相│₪,RNA分佈在上清層中☁╃╃。
 
  收集上清層後│₪,經異丙醇沉澱便可以回收得到總RNA☁╃╃。提取的總RNA完整性好│₪,無蛋白和DNA汙染│₪,可用於各種分子生物學常規實驗│₪,如RT-PCR.Real-time RT-PCR╃▩₪╃、Northern Blot╃▩₪╃、Dot Blot╃▩₪╃、體外翻譯等☁╃╃。
 
  下面讓我們來了解一下使用RNA提取試劑前的準備事項吧:
 
  1.預防RNase汙染│₪,應注意以下幾方面:
 
  1)使用無RNase的塑膠製品和槍頭│₪,避免交叉汙染☁╃╃。
 
  2)玻璃器皿應在使用前於180℃高溫下幹烤4小時│₪,塑膠器皿可在0.5MNaOH中浸泡10分鐘│₪,用水徹底沖洗後高壓滅菌☁╃╃。3)配製溶液應使用無RNase的水☁╃╃。
 
  4)操作人員戴一次性口罩和手套│₪,實驗過程中要勘換手套☁╃╃。2.提取的樣品避免反覆凍融│₪,否則影響RNA提取得率和質量☁╃╃。
 
  3│₪,本品中含有苯酚│₪,具有毒性和腐蝕性☁╃╃。如果吸入體內╃▩₪╃、接觸皮膚╃▩₪╃、吞食等會導致中毒╃▩₪╃、灼傷以及其他身體傷害☁╃╃。使用本製品時應穿戴防護物品│₪,如手套╃▩₪╃、眼罩╃▩₪╃、面罩等☁╃╃。如果不小心接觸到眼睛│₪,應立即用大量的水沖洗並前往醫院治療☁╃╃。
 
  4.樣品用TRIzon勻漿後│₪,如不即刻加入氯仿│₪,置於-70°℃下可放置一個月以上☁╃╃。
 
  5│₪,儲存在75%乙醇中的RNA沉澱│₪,2-8C可以儲存一週│₪,-20C條件下可以儲存1年☁╃╃。RNA半衰期比較短│₪,容易降解│₪,建議提取後儘快進行後續實驗│₪,如反轉錄成cDNA│₪,Northern Blot等☁╃╃。
 
  6.若下游實驗對DNA非常敏感│₪,建議用不含RNase的DNasel(貨號:CW2090A)對RNA進行處理☁╃╃。

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